Ποια είναι η φόρμουλα για την απόδοση μετασχηματισμού;
Ποια είναι η φόρμουλα για την απόδοση μετασχηματισμού;

Βίντεο: Ποια είναι η φόρμουλα για την απόδοση μετασχηματισμού;

Βίντεο: Ποια είναι η φόρμουλα για την απόδοση μετασχηματισμού;
Βίντεο: Ο Πλήρης Οδηγός Scrum Master - 5 χρόνια εμπειρίας σε 2 ώρες 2024, Νοέμβριος
Anonim

Μπορεί να υπολογιστεί διαιρώντας τον αριθμό των επιτυχημένων μετασχηματισμών με την ποσότητα του DNA που χρησιμοποιήθηκε κατά τη διάρκεια α μεταμόρφωση διαδικασία.

Κατά συνέπεια, τι είναι μια κανονική απόδοση μετασχηματισμού;

Αυτό διαιρείται με την ποσότητα του DNA που χρησιμοποιείται στο μεταμόρφωση και εκφράζεται ως μετασχηματιστές ανά μικρογραμμάριο DNA. Αποτελεσματικότητα μετασχηματισμού μεταξύ 10^6 και 10^9 αντιπροσωπεύουν το φυσιολογικό εύρος για ικανά κύτταρα E. coli.

Στη συνέχεια, το ερώτημα είναι, ποια είναι η αποτελεσματικότητα μετασχηματισμού του E coli; Αποτελεσματικότητα μετασχηματισμού ορίζεται ως ο αριθμός των μονάδων που σχηματίζουν αποικίες (cfu) που θα παράγονται από μεταμορφώνοντας 1 μg πλασμιδίου σε δεδομένο όγκο ικανών κυττάρων. Ο όρος είναι κάπως παραπλανητικός καθώς 1 μg πλασμιδίου είναι σπάνια στην πραγματικότητα μεταμορφώθηκε.

Παρομοίως, ποιοι παράγοντες επηρεάζουν την αποτελεσματικότητα του μετασχηματισμού;

Οι παράγοντες που επηρεάζουν την αποτελεσματικότητα του μετασχηματισμού είναι οι ένταση του βακτήρια , η φάση ανάπτυξης της βακτηριακής αποικίας, η σύνθεση του μείγματος μετασχηματισμού, και το Μέγεθος και κατάσταση του ξένου DNA.

Είναι ο βακτηριακός μετασχηματισμός αποτελεσματικός;

Παράγοντες που επηρεάζουν Αποτελεσματικότητα Μετασχηματισμού ο μεταμόρφωση αντίδραση είναι αποτελεσματικός όταν χρησιμοποιούνται <10 ng DNA. Το pUC19 DNA (0,1 ng) είναι κατάλληλο ως έλεγχος. Το υπερτυλιγμένο DNA είναι το περισσότερο αποτελεσματικός Για μεταμόρφωση σε σύγκριση με γραμμικό ή ssDNA που έχει το αποτελεσματικότητα μετασχηματισμού από <1%.

Συνιστάται: