Γιατί χρησιμοποιείται η μεμβράνη νιτροκυτταρίνης στο Southern blotting;
Γιατί χρησιμοποιείται η μεμβράνη νιτροκυτταρίνης στο Southern blotting;

Βίντεο: Γιατί χρησιμοποιείται η μεμβράνη νιτροκυτταρίνης στο Southern blotting;

Βίντεο: Γιατί χρησιμοποιείται η μεμβράνη νιτροκυτταρίνης στο Southern blotting;
Βίντεο: Immunology | Lecture #14 | Molecular Diagnostic Techniques | Part 1 2024, Νοέμβριος
Anonim

Στο αρχικό πρωτόκολλο μεμβράνη νιτροκυτταρίνης υπήρξαν μεταχειρισμένος για το στύπωμα σε περίπτωση που Southern blot αλλά στους πρόσφατους χρόνους νάιλον μεμβράνες έχουν εφαρμοστεί για την στύπωμα διαδικασία λόγω της ικανότητάς τους να δεσμεύουν περισσότερη ποσότητα DNA αποτελεσματικά, γεγονός που επιτρέπει την Southern blot να πραγματοποιηθεί με μικρότερη ποσότητα

Αντίστοιχα, γιατί χρησιμοποιείται η μεμβράνη νιτροκυτταρίνης στο στύπωμα;

Μεμβράνες νιτροκυτταρίνης είναι μια δημοφιλής μήτρα μεταχειρισμένος σε πρωτεΐνη στύπωμα λόγω της υψηλής τους συγγένειας δέσμευσης πρωτεϊνών, της συμβατότητάς τους με μια ποικιλία μεθόδων ανίχνευσης (χημειοφωταύγεια, χρωμογόνος και φθορισμός) και της ικανότητας ακινητοποίησης πρωτεϊνών, γλυκοπρωτεϊνών ή νουκλεϊκών οξέων.

Επίσης, γιατί το DNA μεταφέρεται σε μια νάιλον μεμβράνη; Χρησιμοποιώντας 0,4 Μ NaOH ως ΜΕΤΑΦΟΡΑ διαλύτη μετά από σύντομη προεπεξεργασία της γέλης σε οξύ, DNA αποπουρινώνεται κατά τη διάρκεια ΜΕΤΑΦΟΡΑ . Εκθεση του DNA στο υπεριώδες φως, είτε στο τζελ είτε μετά ΜΕΤΑΦΟΡΑ προς το νάιλον μεμβράνη , μειώνει την ικανότητά του να υβριδοποιείται.

Επιπλέον, ποιος είναι ο σκοπός του Southern blotting;

ΕΝΑ Southern blot είναι μια μέθοδος που χρησιμοποιείται στη μοριακή βιολογία για την ανίχνευση μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας DNA σε δείγματα DNA. Southern blotting συνδυάζει τη μεταφορά των διαχωρισμένων με ηλεκτροφόρηση θραυσμάτων DNA σε μια μεμβράνη φίλτρου και την επακόλουθη ανίχνευση θραυσμάτων με υβριδισμό ανιχνευτή.

Πώς βοηθά το Southern blotting στις ιατροδικαστικές μελέτες;

ΕΝΑ Southern blot , που πήρε το όνομά του από τον εφευρέτη του Έντουιν Νότιος , είναι μια μέθοδος που χρησιμοποιείται για τον έλεγχο της παρουσίας μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας DNA σε ένα δείγμα DNA. Μόλις το DNA ενός ατόμου αφομοιωθεί με ένα συγκεκριμένο ένζυμο περιορισμού, τα προκύπτοντα θραύσματα αναλύονται με Southern blot ανάλυση.

Συνιστάται: