Σε τι χρησιμοποιείται το Coomassie blue στο SDS PAGE;

2024 Συγγραφέας: Miles Stephen | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2023-12-15 23:35

Είναι αυτό χρήσιμο;

Ναι όχι

Επιπλέον, γιατί χρησιμοποιείται το μπλε Coomassie στη ΣΕΛΙΔΑ SDS;

Μπλε λεκές Coomassie είναι μεταχειρισμένος προς το λεκές τις πρωτεϊνικές ζώνες σε πηκτώματα πολυακρυλαμιδίου. Η χρωστική ουσία συνδέεται πιο σφιχτά με τις πρωτεΐνες παρά με τις πρωτεΐνες γέλη μήτρα, ωστόσο, έτσι ώστε η βαφή να μπορεί στη συνέχεια να αφαιρεθεί μόνο από τα απαλλαγμένα από πρωτεΐνες μέρη του γέλη χρησιμοποιώντας παρόμοιο διαλύτη από τον οποίο παραλείπεται η βαφή. Αυτό είναι το πεπρωμένο.

Ομοίως, με ποια αμινοξέα συνδέεται το Coomassie blue; Σε όξινες συνθήκες, η βαφή συνδέεται με πρωτεΐνες κυρίως μέσω βασικών αμινοξέων (πρωτίστως αργινίνη , λυσίνη και ιστιδίνη ), και ο αριθμός των προσδεμάτων βαφής coomassie που συνδέονται σε κάθε μόριο πρωτεΐνης είναι περίπου ανάλογος με τον αριθμό των θετικών φορτίων που βρίσκονται στην πρωτεΐνη.

Εκτός από τα παραπάνω, ποιος είναι ο ρόλος του μπλε βρωμοφαινόλης στη ΣΕΛΙΔΑ SDS;

Συχνά χρησιμοποιείται ως βαφή παρακολούθησης κατά τη διάρκεια της αγαρόζης ή του πολυακρυλαμιδίου γέλη ηλεκτροφόρηση. Μπλε βρωμοφαινόλης έχει ένα ελαφρύ αρνητικό φορτίο και θα μεταναστεύσει την ίδια κατεύθυνση με το DNA, επιτρέποντας στον χρήστη να παρακολουθεί την πρόοδο των μορίων που κινούνται μέσω του γέλη . Ο ρυθμός μετανάστευσης ποικίλλει ανάλογα με γέλη σύνθεση.

Ποια είναι η λειτουργία του SDS στη ΣΕΛΙΔΑ SDS;

Χρησιμοποιεί μόρια δωδεκυλοθειικού νατρίου (SDS) για να βοηθήσει στην αναγνώριση και απομόνωση πρωτεΐνη μόρια. Το SDS-PAGE είναι ένα ασυνεχές ηλεκτροφορητικό σύστημα που αναπτύχθηκε από τον Ulrich K. Laemmli και χρησιμοποιείται συνήθως ως μέθοδος διαχωρισμού πρωτεΐνες με μοριακές μάζες μεταξύ 5 και 250 KDa.