Πίνακας περιεχομένων:
Βίντεο: Πώς βρίσκετε τη συγκέντρωση του DNA από την απορρόφηση;
2024 Συγγραφέας: Miles Stephen | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2023-12-15 23:35
Συγκέντρωση DNA υπολογίζεται με τη μέτρηση του απορρόφηση στα 260nm, ρυθμίζοντας το Α260 μέτρηση για θολότητα (μετριέται με απορρόφηση στα 320 nm), πολλαπλασιάζοντας με τον συντελεστή αραίωσης και χρησιμοποιώντας τη σχέση που ένα Α260 1,0 = 50 μg/ml καθαρού dsDNA.
Ομοίως, οι άνθρωποι ρωτούν, πώς βρίσκετε τη συγκέντρωση του DNA;
Για να προσδιορίσετε τη συγκέντρωση του DNA στο αρχικό δείγμα, εκτελέστε τον ακόλουθο υπολογισμό:
- Συγκέντρωση dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × συντελεστής αραίωσης.
- Συγκέντρωση dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
- Συγκέντρωση dsDNA = 1,63 mg/mL.
Επίσης, τι είναι μια καλή συγκέντρωση DNA; ΕΝΑ Καλός ποιότητα DNA Το δείγμα πρέπει να έχει Α260/ΕΝΑ280 αναλογία 1,7-2,0 και Α260/ΕΝΑ230 αναλογία μεγαλύτερη από 1,5, αλλά επειδή η ευαισθησία των διαφορετικών τεχνικών σε αυτές τις προσμείξεις ποικίλλει, αυτές οι τιμές θα πρέπει να λαμβάνονται μόνο ως οδηγός για την καθαρότητα του δείγματός σας.
Με αυτόν τον τρόπο απορροφά το DNA στα 280 nm;
Η αναλογία απορρόφησης είναι 260 nm vs 280 nm είναι χρησιμοποιείται συνήθως για την αξιολόγηση DNA μόλυνση πρωτεϊνικών διαλυμάτων, καθώς οι πρωτεΐνες (ιδίως τα αρωματικά αμινοξέα) απορροφώ φως σε 280 nm.
Πώς χρησιμοποιείτε το NanoDrop για συγκέντρωση DNA;
Βασικά το νανοσταγόνα σας δίνει την επιλογή να επιλέξετε DNA , RNA, Πρωτεΐνες. Πρέπει να επιλέξετε DNA , μετά τοποθετήστε 2 ΜL νερού (προτιμάται σε mili Q) επιλέξτε "Κενό" μετά τοποθετήστε άλλα 2 ΜL νερού για να επιβεβαιώσετε ότι το μέτρο είναι 0. Στη συνέχεια τοποθετήστε 2 ΜL από το δείγμα σας. Θα πάρετε τη μέτρηση.
Συνιστάται:
Πώς μπορεί ο δεσμός υδρογόνου μεταξύ των μορίων του νερού να εξηγήσει την ικανότητα του νερού να απορροφά μεγάλες ποσότητες ενέργειας πριν από την εξάτμιση;
Οι δεσμοί υδρογόνου στο νερό του επιτρέπουν να απορροφά και να απελευθερώνει θερμική ενέργεια πιο αργά από πολλές άλλες ουσίες. Η θερμοκρασία είναι ένα μέτρο της κίνησης (κινητικής ενέργειας) των μορίων. Καθώς η κίνηση αυξάνεται, η ενέργεια είναι υψηλότερη και επομένως η θερμοκρασία είναι υψηλότερη
Πώς βρίσκετε τη μοριακότητα από την απορρόφηση;
Η εξίσωση πρέπει να είναι σε μορφή y=mx + b. Έτσι, αν αφαιρέσετε την τομή σας από την απορρόφηση και διαιρέσετε με την κλίση, βρίσκετε τη συγκέντρωση του δείγματός σας
Πώς βρίσκετε το μήκος κύματος από την απορρόφηση;
Πολλαπλασιάστε το l με το c και στη συνέχεια διαιρέστε το A με το γινόμενο για να λύσετε τη μοριακή απορροφητικότητα. Για παράδειγμα: Χρησιμοποιώντας μια κυβέτα μήκους 1 cm, μετρήσατε την απορρόφηση ενός διαλύματος με συγκέντρωση 0,05 mol/L. Η απορρόφηση σε μήκος κύματος 280 nm ήταν 1,5
Πώς βρίσκετε σταθερά την ισορροπία από την απορρόφηση;
X = [Fe(SCN)2+] και πρέπει να προσδιοριστεί από την τυπική καμπύλη. Στη συνέχεια, μπορείτε να υπολογίσετε τη σταθερά ισορροπίας, Keq, χρησιμοποιώντας τις συγκεντρώσεις ισορροπίας. Η τυπική καμπύλη είναι μια γραφική παράσταση της Απορρόφησης έναντι του [Fe(SCN)2+] (Εικόνα 8.1). Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να μας δώσει τη συγκέντρωση ενός διαλύματος όταν δίνεται η απορρόφηση
Πώς βρίσκετε την επιτάχυνση από την ταχύτητα;
Ο υπολογισμός της επιτάχυνσης περιλαμβάνει τη διαίρεση της ταχύτητας με το χρόνο - ή ως προς τις μονάδες SI, τη διαίρεση του μέτρου ανά δευτερόλεπτο [m/s] με το δευτερόλεπτο [s]. Η διαίρεση της απόστασης με το χρόνο δύο φορές είναι ίδια με τη διαίρεση της απόστασης με το τετράγωνο του χρόνου. Επομένως, η μονάδα επιτάχυνσης SI είναι το μέτρο ανά δευτερόλεπτο στο τετράγωνο