Το Northern blotting χρησιμοποιεί ένζυμα περιορισμού;
Το Northern blotting χρησιμοποιεί ένζυμα περιορισμού;

Βίντεο: Το Northern blotting χρησιμοποιεί ένζυμα περιορισμού;

Βίντεο: Το Northern blotting χρησιμοποιεί ένζυμα περιορισμού;
Βίντεο: Rare Disease Day Webinar 2024, Νοέμβριος
Anonim

Το πρώτο βήμα μέσα Northern blotting απαιτεί απομόνωση RNA από βιολογικά δείγματα. Μόλις απομονωθεί το RNA, τα δείγματα RNA διαχωρίζονται κατά μέγεθος μέσω ηλεκτροφόρησης πηκτής. Το πρώτο βήμα στα Νότια Στύπωμα περιλαμβάνει την πλήρη πέψη του DNA που θα αναλυθεί με α ένζυμο περιορισμού.

Εδώ, τι κάνει ένα Northern blot;

ΕΝΑ βόρεια κηλίδα είναι μια εργαστηριακή μέθοδος που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση συγκεκριμένων μορίων RNA μεταξύ ενός μείγματος RNA. Northern blotting μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανάλυση δείγματος RNA από συγκεκριμένο τύπο ιστού ή κυττάρου προκειμένου να μετρηθεί η έκφραση RNA συγκεκριμένων γονιδίων.

Μπορεί επίσης να ρωτήσει κανείς, ποιο υλικό αναλύεται με την τεχνική του Northern blotting; RNA

Οι άνθρωποι ρωτούν επίσης, ποια είναι η διαφορά μεταξύ του Southern blotting και του Northern blotting;

ΕΝΑ Southern blot (γραπτός με κεφαλαίο «S» γιατί πήρε το όνομά του από τον Βρετανό βιολόγο Έντουιν Νότιος ) χρησιμοποιείται κυρίως για την ανίχνευση μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας DNA σε ένα Δείγματα DNA. ο βόρεια κηλίδα χρησιμοποιείται κυρίως για τη μελέτη της γονιδιακής έκφρασης με ανίχνευση ειδών RNA ή RNA (όπως το mRNA).

Ποιος είναι ο σκοπός του προυβριδισμού;

Προϋβριδισμός (Αποκλεισμός) Το DNA του σπέρματος σολομού χρησιμοποιείται συνήθως ως ανασταλτικός παράγοντας για την πρόληψη της προσκόλλησης του ανιχνευτή στη μεμβράνη, διασφαλίζοντας ότι θα αλληλεπιδράσει μόνο με τις επιθυμητές ζώνες DNA που έχουν μεταφερθεί στη μεμβράνη.

Συνιστάται:

Πώς ενεργοποιούνται και αναστέλλονται τα ένζυμα;

Πώς ενεργοποιούνται και αναστέλλονται τα ένζυμα;

Θυμηθείτε ότι σε μια κανονική ενζυματική αλληλεπίδραση, ένα ένζυμο θα αναγνωρίσει και θα δεσμευτεί σε ένα υπόστρωμα για να καταλύσει μια αντίδραση. Στη συνέχεια θα απελευθερώσει τα προϊόντα. Η ανταγωνιστική αναστολή είναι η διακοπή της ικανότητας ενός ενζύμου να δεσμεύεται σε ένα υπόστρωμα λόγω διαφορετικού μορίου που δεσμεύεται στο ενεργό κέντρο

Γιατί τα ένζυμα περιγράφονται ως ειδικά;

Γιατί τα ένζυμα περιγράφονται ως ειδικά;

Ειδικότητα ενζύμου Κάθε διαφορετικός τύπος ενζύμου συνήθως καταλύει μία βιολογική αντίδραση. Τα ένζυμα είναι συγκεκριμένα επειδή διαφορετικά ένζυμα έχουν διαφορετικού σχήματος ενεργές θέσεις. Το σχήμα της ενεργού θέσης ενός ενζύμου είναι συμπληρωματικό με το σχήμα του συγκεκριμένου υποστρώματος ή υποστρωμάτων του. Αυτό σημαίνει ότι μπορούν να ταιριάζουν μεταξύ τους

Τι συμβαίνει στα ένζυμα κατά την επαγόμενη προσαρμογή;

Τι συμβαίνει στα ένζυμα κατά την επαγόμενη προσαρμογή;

Όταν ένα ένζυμο δεσμεύεται στο κατάλληλο υπόστρωμα, συμβαίνουν ανεπαίσθητες αλλαγές στη δραστική θέση. Αυτή η μεταβολή της ενεργού θέσης είναι γνωστή ως επαγόμενη προσαρμογή. Η επαγόμενη εφαρμογή ενισχύει την κατάλυση, καθώς το ένζυμο μετατρέπει το υπόστρωμα σε προϊόν. Η απελευθέρωση των προϊόντων επαναφέρει το ένζυμο στην αρχική του μορφή

Ισχύει η εξίσωση Michaelis Menten για όλα τα ένζυμα;

Ισχύει η εξίσωση Michaelis Menten για όλα τα ένζυμα;

Σε αντίθεση με πολλά ένζυμα, τα αλλοστερικά ένζυμα δεν υπακούουν στην κινητική Michaelis-Menten. Έτσι, τα αλλοστερικά ένζυμα δείχνουν τη σιγμοδιακή καμπύλη που φαίνεται παραπάνω. Η γραφική παράσταση για την ταχύτητα αντίδρασης, vo, έναντι της συγκέντρωσης του υποστρώματος δεν εμφανίζει την υπερβολική γραφική παράσταση που προβλέπεται χρησιμοποιώντας την εξίσωση Michaelis-Menten

Πώς βρίσκετε το πεδίο ορισμού ενός περιορισμού σε μια εξίσωση;

Πώς βρίσκετε το πεδίο ορισμού ενός περιορισμού σε μια εξίσωση;

Πώς να: Με δεδομένη μια συνάρτηση γραμμένη σε μορφή εξίσωσης που περιλαμβάνει ένα κλάσμα, βρείτε τον τομέα. Προσδιορίστε τις τιμές εισόδου. Προσδιορίστε τυχόν περιορισμούς στην είσοδο. Εάν υπάρχει παρονομαστής στον τύπο της συνάρτησης, ορίστε τον παρονομαστή ίσο με μηδέν και λύστε για x